服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
全國統(tǒng)一服務(wù)熱線：
15201736385
產(chǎn)品中心您當(dāng)前的位置：首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細胞 > 大鼠原代細胞 > 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞
基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：組織相容性抗原DOB抗體 血小板白細胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體 ORC5L蛋白抗體 大鼠食管上皮細胞 小鼠腦動脈血管內(nèi)皮細胞 人結(jié)腸癌細胞細胞；COLO678 產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：374
更新時間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7243 |
細胞簡介：
大鼠腎小球內(nèi)皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形，單層貼壁生長；細胞質(zhì)豐富，細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細胞被覆于腎小球毛細血管壁腔側(cè)，與血流直接接觸，是腎小球濾過膜的道屏障，可粘附細菌和白細胞，修復(fù)基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細胞在免疫學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究價值。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠腎小球內(nèi)皮采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化，結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠腎小球內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人粘蛋白6(MUC6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human MUC6 (Mucin 6) ELISA Kit
人肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human MYBPC3 (Myosin Binding Protein C, Cardiac) ELISA Kit
人肌球蛋白重鏈10(MYH10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human MYH10 (Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit
人肌球蛋白重鏈9(MYH9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) ELISA Kit
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)試劑盒
HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancyclophilinB,CyPB試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織HCK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副流感病毒IgG抗體(ai-PIVIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
丙酮酸脫氫酶E1β亞基抗體
鈉碘轉(zhuǎn)運體蛋白8抗體
CHEK1重組小鼠 CHK1 / CHEK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重組蛋白 Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)
BCL2L12重組人 BCL2L12 / BCL2-like 12 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
IRAK4 Protein Human 重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白
CXCL12 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
T-細胞可誘導(dǎo)共刺激分子(ICOS)重組蛋白 Recombinant Inducible T-Cell Co Stimulator (ICOS)
IRAK4 Protein Human 重組人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白
LIF重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GABARAPL1重組人 ATG8 / GABARAPL1 蛋白 Protein
大鼠腎小球內(nèi)皮細胞人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE/ADAM17)ELISA 試劑盒
Human ue insulin (TI) ELISA Kit 人真胰島素(TI)試劑盒
HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit 人熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanhiston-H2b試劑盒人組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量試劑盒20次
Humanlowdensitylipoprotein，LDLELISAKit人低密度脂蛋白(LDL)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
