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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

小鼠食管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:前列腺相關(guān)蛋白MSMP抗體 鋅指蛋白704抗體 泛素蛋白連接酶M抗體 小鼠輸尿管上皮細(xì)胞 大鼠結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞 MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;HEK293T-EGFP-PURO

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問(wèn)量:1094

更新時(shí)間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

食管組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7114

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠食管平滑肌分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過(guò)膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱為食管上括約肌;位于食管下端,一部分在膈上,穿過(guò)膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠食管平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠食管平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A   英文名稱:   vascuiar endothelial growth factor A   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   VEGF-A

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C   英文名稱:   vascuiar endothelial growth factor C   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   VEGF-C

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D   英文名稱:   vascuiar endothelial growth factor D   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   VEGF-D

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165   英文名稱:   vascuiar endothelial growth factor 165   規(guī)格:      英文縮寫(xiě):   VEGF165

小鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 人顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

Humaelaxin,RLNELISAKit 人松弛肽/松弛素(RLN)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor6-OHDA(Human6-hydroxydopamine)ELISAKit6-羥多巴胺

銀染法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10

MouseMelatonin,MTELISAKit小鼠褪黑素(MT)試劑盒規(guī)格:96T/48T

α-(1,3)-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶 4單克隆抗體

PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD10單克隆抗體

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)

REG3A重組人 REG3A / HIP 蛋白 Protein

CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白

IL6R Protein Human 重組人 IL6R / CD126 蛋白

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)

CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL6R Protein Human 重組人 IL6R / CD126 蛋白

REG3A重組人 REG3A / HIP 蛋白 Protein

小鼠食管平滑肌細(xì)胞大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)試劑盒 ,英文名: DAT ELISA Kit

Porcine noradrenaline (NE) ELISA Kit 豬去甲(NE)試劑盒

蝦特定基因序列(FC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforLXA4(HumanLipoxinA4)ELISAKit人脂氧素A4

體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50

ELISAKitVEGF雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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